熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ)及檢測(cè)原理
2021-12-08
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熒光檢測(cè)器是高壓液相色譜儀常用的一種檢測(cè)器。用紫外線照射色譜餾分，當(dāng)試樣組分具有熒光性能時(shí)，即可檢出。
熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ)：
在光致發(fā)光中，發(fā)射出的輻射總依賴于所吸收的輻射量。由于一個(gè)受激發(fā)的分子回到基態(tài)時(shí)可能以無輻射躍遷的形式產(chǎn)生能量損失，因而發(fā)射輻射的光子數(shù)通常都少于吸收輻射的光子數(shù)，它以量子效率Q來表示。
在固定的實(shí)驗(yàn)條件下，量子效率是個(gè)常數(shù)，通常Q小于1。對(duì)可用熒光檢測(cè)的物質(zhì)來說，Q值一般在0.1～0.9之間。熒光強(qiáng)度F與吸收光強(qiáng)度成正比。
對(duì)于稀溶液，熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)溶液濃度、摩爾吸光系數(shù)、吸收池厚度、入射光強(qiáng)度、熒光的量子效率及熒光的收集效率等成正相關(guān)。在其他因素保持不變的條件下，物質(zhì)的熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)溶液濃度成正比,這是熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ)。熒光檢測(cè)器屬于溶質(zhì)型檢測(cè)器，可直接用于定量分析。
熒光檢測(cè)器的檢測(cè)原理：
化合物受紫外光激發(fā)后，發(fā)射出比激發(fā)光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光，稱為熒光；
熒光強(qiáng)度 (F) 與激發(fā)光強(qiáng)度 (I0) 及熒光物質(zhì)濃度 (C) 之間的關(guān)系為：F=2.3QKI0εCl
F=KC
Q為量子產(chǎn)率，K為熒光效率，ε為摩爾吸光系數(shù)，l為光徑長(zhǎng)度。
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